- 品名： 白鯊Biosharp BL926A DiD (細(xì)胞膜遠(yuǎn)紅外熒光探針)
- 型號(hào)： BL926A
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品簡介：
DiD，DiO，DiI和DiR染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色，這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散，最佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯：DiI（紅色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（遠(yuǎn)紅外熒光）和 DiR （深紅色熒光），這使得他們可以用來對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。
DiD是DiI的類似物，但具有更長的激發(fā)和發(fā)射波長，為遠(yuǎn)紅外熒光，在一些細(xì)胞和組織染色中更有優(yōu)勢，特別適合用于進(jìn)行多種熒光的同時(shí)染色。DiD可被633nm的氦-氖激光所激發(fā)，DiD在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱，僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiD被激發(fā)后可以發(fā)出遠(yuǎn)紅外的熒光，最大激發(fā)波長為644nm，最大發(fā)射波長為663nm。
DiD被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。還用于檢測細(xì)胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移，通過FRAP檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散，檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
DiD染色后可以兼容免疫熒光實(shí)驗(yàn)。建議使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黃皂苷配制的不會(huì)溶解細(xì)胞膜的通透液進(jìn)行通透，其它去垢劑配制的通透液可能會(huì)溶解細(xì)胞膜上的脂類物質(zhì)，造成DiD失去結(jié)合位置，最終導(dǎo)致DiD的染色失效。但通透也可能會(huì)影響DiD在細(xì)胞膜上的定位并會(huì)增加細(xì)胞內(nèi)的染色，具體實(shí)驗(yàn)中需根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求選擇合適的細(xì)胞通透液。
產(chǎn)品信息：
英文名：DiIC18(5); 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate
分子式：C61H99ClN2O4
分子量：959.91
純度：≥95%
使用方法（僅供參考）：
一、DiD細(xì)胞膜染色液制備
1．配置DMSO或EtOH 儲(chǔ)存液：用DMSO或EtOH配置濃度1-5 mM的儲(chǔ)存液。
2．工作液制備：用合適的緩沖液（如無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為1-5 μM的工作液。
注：工作液的最終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來配制，可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。
二、細(xì)胞染色
a.對(duì)于懸浮細(xì)胞
1．懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。
2．在37℃培養(yǎng)細(xì)胞5～20分鐘，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。
3．1000-1500rpm離心5分鐘。
4．去除上清，再次緩慢加入37℃預(yù)溫的培養(yǎng)液。
5．重復(fù)步驟3和4，兩次以上。
b.對(duì)于貼壁細(xì)胞
1．吸去多余的培養(yǎng)液。
2．加入染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。
3．在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 5～20分鐘，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。
4．吸去染料工作液，用培養(yǎng)液清洗2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。
三、結(jié)果分析
顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀檢測
注意事項(xiàng)：
1、熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
2、本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
3、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件：
-20℃干燥避光保存，有效期一年。
